Tinción de Bacterias

 

Introducción

 

Encontramos microorganismos en todas partes, en el suelo, en el agua, en el aire y sobre y dentro de organismos multicelulares incluyendo los humanos.  A este grupo de microorganismos se les llama la flora normal microbiana. Hay algunos microorganismos que permanecen por pocos días o hasta meses en nuestro cuerpo, a este tipo de flora se le llama transitoria. La asociación entre dos organismos se llama simbiosis y esto ocurre con nuestra flora bacteriana, al igual que con la asociación de otros organismos. La relación puede ser beneficiosa o prejudicial. Algunas bacterias beneficiosas para nosotros son el género Lactobacillus y  Escherichia coli, esta última nos provee vitamina K y ciertas vitaminas del complejo B. Las siguientes partes del cuerpo contienen su propia flora microbiana: nariz, boca, conjuntiva, oído externo, estómago, piel, uretra, vagina, intestino delgado e intestino grueso. Si estas bacterias pasan de su lugar natural del cuerpo a otra parte del cuerpo pueden ocasionar enfermedades. Esto ya sería una relación prejudicial.

 

Podemos obtener bacterias de nuestro ambiente o de diferentes partes de la piel, boca, nariz y garganta. La boca contiene millones de bacterias en cada mililitro de saliva y en distintos organismos puede varios de acuerdo a su régimen alimentario.  Algunas de ellas son bacterias transitorias que llegan aquí con los alimentos.

 

En este ejercicio utilizaremos bacterias obtenidas de diversas fuentes para realizar una tinción simple.

Procedimiento

 

1.      Limpia y seca las laminillas

2.      Rotule las laminillas con sus iniciales y el tinte utilizado (puede utilizar

                  cualquiera de los mencionados en los materiales)

3.      Obtención de bacterias:

a.                   Tome un palillo de dientes y páselo entre sus dientes para obtener las

                        bacterias.

b.                  Obtenga un hisopo (“Q Tips”) estéril y páselo sobre cualquier superficie

                        de su cuerpo.

c.                   Tome una gota de agua recolectada.

d.                  Diluya una porción pequeña de tierra en agua destilada estéril.

4.      Eche una gota de agua sobre la laminilla si la obtención de bacterias es por los

                  primeros 2 métodos. Si utiliza los últimos 2 coloque una gota del agua

                  recolectada o tierra diluida sobre la laminilla.

5.      Esparza el material obtenido de la boca u otra área del cuerpo sobre la

                  laminilla. Haga lo mismo si utiliza agua o tierra diluida.

6.      Pase la laminilla sobre la flama del mechero por unos cuantos segundos (45 

                  segundos aproximadamente). Cuidado no mantenga la laminilla estática bajola     

                  flama ya que se puede romper o usted se puede quemar. El propósito de hacer    

                 esto es para matar y fijar las bacterias a la laminilla. La laminilla debe de estar

                 seca.

7.      Coloque la laminilla sobre la bandeja de tinción y eche una o dos gotas del 

                   tinte azul de metileno, safranina o cristal violeta. Espere por un minuto.

8.      Incline con su mano la laminilla y enjuague con el agua que se encuentra en la 

                  botella.

9.      Seque la laminilla de esta forma: coloque la laminilla sobre papel secante o

                  papel toalla, doble el papel sobre la laminilla y seque el exceso de agua.

10.  Observe las laminillas preparadas por el microscopio. Recuerde que 

                  comienza a observar la laminilla con el objetivo (lente) de menor aumento,

                  esto es 4X, luego con los siguientes objetivos y por ultimo el de 100X, con el

                  cual utilitarían aceite de inmersión.

 

 

Bibliografía

 

Pollack, R.A., Findlay, L., Mondschein, W. and Modesto R.R. 2002. Laboratory Exercises in Microbiology. John Wiley & Sons, Inc. 232pp.

 

Cappuccino, J.G. and Sherman, N. 2001. Microbiology a Laboratory Manual 5 th edition. Benjamin Cumming Publishing.